题目
如若在PCR引物中引入酶切位点,引物的组成为A. 保护碱基+靶序列+酶切位点B. 酶切位点+保护碱基+靶序列C. 保护碱基+酶切位点+靶序列D. 靶序列+保护碱基+酶切位点
如若在PCR引物中引入酶切位点,引物的组成为
A. 保护碱基+靶序列+酶切位点
B. 酶切位点+保护碱基+靶序列
C. 保护碱基+酶切位点+靶序列
D. 靶序列+保护碱基+酶切位点
题目解答
答案
C. 保护碱基+酶切位点+靶序列
解析
本题考查PCR引物中引入酶切位点时引物的组成结构相关知识。解题思路是明确引物各部分的作用及顺序。
在PCR引物中引入酶切位点时,引物一般由三部分组成。保护碱基的作用是为了保证限制性内切酶能够有效地识别和切割酶切位点。因为如果没有保护碱基,紧邻引物5'端的酶切位点可能无法被限制性内切酶正确识别和切割,所以保护碱基应位于引物的最前端。
酶切位点是用于后续将PCR产物进行酶切,以便连接到载体等操作,它需要在保护碱基之后。
靶序列则是与模板DNA互补配对,引导DNA聚合酶沿着模板链合成新的DNA链,所以靶序列位于酶切位点之后。
因此,引物的组成顺序为保护碱基+酶切位点+靶序列。